Considerato uno degli attori che lavorano più duro a Hollywood, Samuel L. Jackson è una star indiscussa, come dimostrato dal fatto che i suoi film abbiano incassato più soldi di qualsiasi altro attore nella storia del cinema.
Jackson ha lasciato un marchio indelebile nel cinema americano grazie al suo ritratto di Jules, il killer filosofo di Pulp Fiction di Quentin Tarantino. Oltre ad ottenere unanimi consensi dalla critica per la sua interpretazione, ha ricevuto delle candidature agli Academy Award e ai Golden Globe come miglior attore non protagonista, mentre nella stessa categoria si è aggiudicato il premio da parte della British Academy of Film and Television Arts.

Un’altra performance premiata e che è rimasta nella storia, è stato il ritratto di un tossicodipendente in Jungle Fever di Spike Lee, che gli ha fatto ottenere il primo ed unico riconoscimento come miglior attore non protagonista mai assegnato dal Festival di Cannes.
Jackson è recentemente apparso nella pellicola di Rod Lurie Resurrecting the Champ, mentre in precedenza aveva un ruolo di contorno nel fortunato film horror della Weinstein Co., 1408, tratto dal racconto di Stephen King. Sempre nel 2007, Jackson ha partecipato a Black Snake Moan di Craig Brewer e al dramma bellico, prodotto dalla MGM, Home of the Brave di Irwin Winkler. Nel 2008, è stato impegnato nella pellicola di fantascienza e azione di Doug Liman Jumper e nella storia criminale Cleaner, per la regia di Renny Harlin.
Nella sua filmografia, figurano anche Snakes on a Plane, Coach Carter, la trilogia di Guerre stellari, In My Country, The man - La talpa (The Man), Gli incredibili (The Incredibles),
S.W.A.T. - Squadra speciale anticrimine (S.W.A.T.), Codice 51 (Formula 51), Ipotesi di reato (Changing Lanes), Crime Shades (Caveman’s Valentine), Il violino rosso (Red Violin), Shaft, Unbreakable - Il predestinato (Unbreakable), 187 (Codice omicidio 187), La baia di Eva
(Eve’s Bayou), Jackie Brown, Il negoziatore (The Negotiator), Die hard - duri a morire (Die Hard with a Vengeance), Spy (The Long Kiss Goodnight) e Blu profondo (Deep Blue Sea).
Sul piccolo schermo, Jackson è stato produttore esecutivo della serie d’animazione di Spike TV Afro Samurai, che ha esordito nel 2007 e che vedrà anche una seconda stagione. Inoltre, Jackson ha un accordo con i New Line Studios per produrre e sviluppare progetti in cui può anche partecipare.