Grazioso tipetto dal visino imbronciato, Mary Lynn Rajskub (il suo cognome si pronuncia Rice-Cub) deve la popolarità all'adrenalinica serie tv 24, dove indossa i panni della schietta ed ultra-tosta analista informatica Chloe O'Brian.
Di origini ceche, l'attrice nasce da Tony e Betty Rajskub nella città di Trenton, dove si diploma nel 1989. Trasferitasi a Detroit per studiare pittura, la giovane si sposta in California e consegue la laurea al San Francisco Art Insitute. Appassionata di cinema sin da bimba, la ragazza decide di dare una svolta alla sua vita cominciando ad esibirsi nelle vesti di mattatrice nei locali di L.A.
Fonda in seguito con Karen Kilgariff il duo comico- musicale "Girls Guitar Club", nel quale canta e suona la chitarra. Dopo aver lavorato in numerose produzioni destinate al piccolo schermo, questa ambiziosa biondina si fa notare nello stralunata comedy Fatti, strafatti e strafighe. Nel 2002 è la sorellina di Adam Sandler in Ubriaco D'Amore diretto da Paul Thomas Anderson, nonché Dorothea nel romantico Tutta colpa dell'amore. L'anno successivo si cala nelle vesti della timida complice di Reese Witherspoon nel "totally pink" Una bionda in Carriera ed entra ufficialmente nel cast del pluripremiato Twenty Four.
Nel 2006 è impegnata a salvare la vita alla famigliola di Harrison Ford nel thriller Firewall - Accesso Negato ma anche nei concorsi di bellezza di Little Miss Sunshine. Nel 2007 gira il divertente American Fork. Grande amica della pop star Fiona Apple, Mary Lynn trascorre il tempo libero dipingendo in compagnia della sua fedele barboncina Claire. E' stata fidanzata con i colleghi David Cross, Duncan Trussell e Jon Brion.