Debuttò nel 1890 al Casino de Paris come cantante eccentrica con il nome di Miss Tinguette. La sua carriera nel music hall decollò ben presto: scritturata all'Eldorado nel 1897 vi rimase per otto anni; poi si esibì in numerosi teatri e nel 1907 trionfò, in coppia con Max Dearly, nella danza di carattere acrobatico La valse chaloupée, che fu per un decennio alla base del suo repertorio. Dopo una fortunata tournée americana (1912), apparve alle Folies Bergère, avviando un sodalizio professionale e sentimentale con il giovane Maurice Chevalier. Insieme crearono La valse renversante, che riscosse un successo pari alla "chaloupée": un film Pathé del 1914 documenta la loro esibizione. Fino alla prima guerra mondiale Mistinguett alternò il music hall al teatro di prosa, ma a partire dal 1914 si dedicò interamente alla rivista, spostandosi tra le Folies-Bergère, il Casino de Paris, il Moulin Rouge ed il Mogador. Trionfale la sua tournée negli Stati Uniti nel 1936. Nel cinema non riuscì ad imporsi anche se, dopo qualche tentativo nel muto, ottenne una parte di rilievo in Rigolboche (1936) diretto da Christian-Jaque. Con la sua brillante verve, i suoi stravaganti costumi - ed un'acconciatura di piume alta quanto lei - e le sue scenografie, dettò lo stile della rivista parigina tra le due guerre e fu considerata, insieme con le sue celebri gambe, un monumento nazionale. Continuò ad esibirsi, sempre adorata dal suo pubblico, fino all'età di 76 anni.