Ha iniziato la sua carriera in radio prima di passare alla televisione locale di Los Angeles, quando questa stava iniziando la sua attività nella West Coast negli anni cinquanta. Dopo aver presentato un programma televisivo locale, ha dato vita a una sua società di produzione, assieme al produttore Don Fedderson e allo sceneggiatore George Tibbles. Ha prodotto la sua prima serie comica, Life with Elizabeth, vincitrice di un Emmy nel 1952; The Betty White Show, un talk show/programma di varietà della NBC; e una sitcom, A Date with the Angels. Appariva frequentemente in spettacoli di varietà e giochi a premio, come ospite frequente di Jack Paar (oltre 70 apparizioni), Merv Griffin e Johnny Carson (tra cui molte volte con i Mighty Carson Art Players). E' anche stata presentatrice-sostituta di tutti i tre show. Era ospite fissa di Mama's Family nei panni della sorella Ellen, un ruolo che ha creato con il resto della compagnia in The Carol Burnett Show.

La sua prima apparizione nel The Mary Tyler Moore Show, durante la quarta serie del programma, l'ha portata a diventare un membro fisso del cast. Il suo ritratto di Sue Ann Nivens, la 'Casalinga felice', le è valso due Emmy come miglior attrice non protagonista nel 1974-75 e nel 1975-76.
Nel 1970-71, ha creato, scritto e presentato la sua serie televisiva dedicata agli animali, The Pet Set. Nel 1976, ha ricevuto il Pacific Pioneers in Broadcasting Golden Ike Award e il Genii Award da parte dell'American Women in Radio and TV. Ha ottenuto il quarto Emmy come miglior presentatrice di un gioco a premi quotidiano grazie a Just Men. E' stata candidata per ben sette volte come miglior attrice protagonista in una serie comica per The Golden Girls, vincendo l'Emmy durante la prima stagione, nel 1985. E' poi apparsa nello spin-off The Golden Palace per una stagione. L'Emmy ottenuto come miglior attrice ospite di una serie comica, quella di The John Larroquette Show, le ha permesso di arrivare a un totale di sei statuette. Nel 1997, è stata candidata come attrice ospite di Suddenly Susan. L'American Comedy Awards le ha conferito il premio come donna più divertente nel 1987, mentre tre anni più tardi l'ha onorata con il riconoscimento alla carriera. Nel 1995, è entrata nella Television Academy's Hall of Fame. Sempre nel 2000, ha ricevuto l'American Comedy Award per l'apparizione di un'attrice in una serie comica, grazie a Ally McBeal. Nel 2002, ha partecipato più volte a That '70s Show.
Ha anche avuto un ruolo ricorrente in Boston Legal e nella soap quotidiana Beautiful (The Bold and the Beautiful).
E' apparsa in diversi film per la televisione, lavorando con Leslie Nielsen in Chance of a Lifetime, The Retrievers per Animal Planet, Stealing Christmas assieme a Tony Danza e Lea Thompson e, nel 2005 per l'Hallmark Channel, Annie's Point, al fianco di Richard Thomas e Amy Davidson.
Sul grande schermo, è stata impegnata con Pioggia infernale (Hard Rain) assieme a Morgan Freeman e Christian Slater, Dennis colpisce ancora (Dennis the Menace Strikes Again!) nei panni della signora Wilson con Don Rickles, Lake Placid, Storia di noi due (The Story of Us) e Un ciclone in casa (Bringing Down the House), al fianco di Steve Martin.
Ha scritto cinque libri, tra cui Betty White's Pet Love, Betty White in Person e Here We Go Again: My Life in Television. Altri due sono stati realizzati assieme a Tom Sullivan, The Leading Lady: Dinah's Story e Together. Nel febbraio del 2006, è stata nominata Ambasciatrice degli Animali, dallo zoo cittadino di Los Angeles grazie al suo costante impegno per il benessere degli animali.