È alla sua settima stagione come membro del cast del Saturday Night Live (e al quarto come copresentatrice del Weekend Update). La Poehler ha lavorato recentemente alle commedie della Warner Bros Spring Breakdown al fianco di Parker Posey, e della Universal Pictures Baby Mama, assieme a Tina Fey. La Poehler è impegnata come produttrice, sceneggiatrice e voce della nuova serie animata del canale Nickelodeon Mighty B, che parla delle avventure di un'ape scout di dieci anni.
22 Lo scorso anno, la Poehler era tra i protagonisti della commedia sul pattinaggio Blades of Glory, assieme a Will Ferrell, Will Arnett e Jon Heder. Ha anche prestato la sua voce al grande successo Shrek terzo (Shrek the Third), in cui interpretava Biancaneve.
La Poehler ha creato un'impressionante serie di personaggi assurdi, dall'iperattiva Caitlin, alla concorrente di un reality show con una gamba sola e alla presentatrice maniaca di Good Morning Meth. La Poehler ha anche fornito delle imitazioni impressionanti di Kelly Ripa, Avril Lavigne, Sharon Osbourne, Paula Abdul, Senator Hillary Clinton, Sharon Stone e Michael Jackson.
E' entrata a far parte del cast del SNL attraverso la Upright Citizens Brigade, un gruppo comico di cabaret che si era formato a Chicago. Lei e la U.C.B. si sono trasferiti a New York, dove hanno dato vita ad uno spettacolo comico su Comedy Central per tre stagioni di cui era sceneggiatrice e interprete. Inoltre, hanno aperto un teatro, che attualmente viene considerato il migliore per gli spettacoli comici di cabaret a New York. La Poehler e la U.C.B. sono stati protagonisti di A.S.S.S.S.C.A.T.: Improv, uno speciale di cabaret andato in onda sul canale Bravo.
Tra gli altri film a cui ha partecipato, ricordiamo Mean Girls, Mr. Woodcock, Southland Tales, Tenacious D e il destino del rock (Tenacious D in The Pick of Destiny), The Ex, Wet Hot American Summer e L'invidia del mio migliore amico (Envy).
La Poehler ha fatto delle apparizioni memorabili a Late Night with Conan O'Brien, Ti presento i miei (Arrested Development), Wonder Showzen e Undeclared. E' anche stata la voce di O'Grady ne I Simpson (The Simpsons).
E' sposata con l'attore Will Arnett e vive a New York.